定义
利用霍夫曼调幅差技术，用以增强染色和非应变样品的对比度的显微镜。
工作原理
霍夫曼调幅差是一种斜照明技术，斜射光照射到样本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度调节器产生不同阴影，从而使透明样本表面产生明暗差异，以增强对比度。这种技术把相位梯度变化转变成强度变化，其系统是由一个放置在物镜的后焦面平面的振幅空间过滤器和一个被放置在聚光器的前平面的起偏器覆盖着的偏心裂口组成。该技术强调样品的相位梯度，所成像呈现三维的立体感，可以获得高相位差图像。霍夫曼调幅差显微镜就是通过检测光学相位梯度来增强染色和非应变样品的对比度的。
结构
霍夫曼调幅差显微镜结构如下图1所示。将一个光学幅度空间滤波器（霍夫曼称之为“调制器”）插入消色差或平消色差物镜的后焦平面。穿过该系统的光强度在平均值上下变化，也即被调制。用于调幅差的物镜的放大倍率约在10倍至100倍左右。
图 1 霍夫曼调幅差显微镜结构
优缺点
霍夫曼调幅差显微镜有很多优点，包括可充分利用物镜的数值孔径，可产生出色的细节分辨率、良好的样本对比度和可见度，图像不会产生光晕以及可将聚光镜的工作距离设计得更长等。
与此同时，霍夫曼调幅差显微镜也有一些缺点和局限性。由于该系统对垂直于狭缝长度的梯度最为敏感，因此观察效果与标本方向密切相关。此外，霍夫曼调幅差显微镜的使用操作也较为复杂。
应用
1、相位物体，如活的、未染色的细胞，组织，细菌和染色体；
2、双折射物体，如肌肉组织、塑料、晶体和植物结构组织；
3、染色试样，如染色的细胞、组织、细菌和染色体；
4、柱状物体，如纤维、毛发、细长形细胞和晶体；
5、具有表面和次表面特征的物体，如块状玻璃、塑料、矿物和液体；
6、混合观察试样，如荧光试样，红外试样。
参考文献
[1] Optical microscopy., Davidson, M. and Abramowitz, M., Encyclopedia of Imaging Science and Technology, Vol. II, Hornak, J. (ed), Wiley-Interscience, New York, 1106-1141 (2002).
[2] Basics of a light microscopy imaging system and its application in biology., Davidson, L. and Keller, R., Methods in Cellular Imaging, Periasamy, A. (ed), Oxford University Press, New York, 53-65 (2001).
[3] Microscopy and microscope optical systems., Lanni, F. and Keller, E., Imaging Neurons: A Laboratory Manual, Yuste, R., Lanni, F. and Konnerth, A., (eds), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1.1-1.72 (2000).
[4] 金卫凤,王亚伟,卜敏,王先凯,姜守望,岳去畏.生物细胞相位显微技术研究进展[J].激光生物学报,2011,20(03):417-424.
