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在相衬显微镜中,通过相板环的环绕光(非衍射)的透射和延迟特性会显着影响显微镜中观察到的整体样品对比度。本交互式教程探讨了由改变相板吸收和延迟特性引起的对比度变化。
图像增强器被开发用于军事用途,以增强我们的夜视能力,通常被称为晶圆管或近距离聚焦增强器。它们有一个平面光电阴极,在微通道板(MCP)电子倍增器的输入侧有一个小间隙,在MCP的背面有一个磷光输出屏。
就数字图像而言,空间分辨率是指用于构建图像的像素数。空间分辨率较高的图像比空间分辨率较低的图像具有更多的像素数。
越来越多的研究正在使用活细胞成像 提供对基本性质的批判性见解的技术 细胞和组织功能,特别是由于快速发展 目前正在荧光蛋白和合成中观察到 荧光基团技术。由于这些进步,活细胞成像 已成为大多数细胞生物学中必不可少的分析工具 实验室,以及在神经生物学,发育生物学的广泛领域, 药理学,以及许多其他相关的生物医学研究学科。
标本室是活细胞成像和广泛的设计已经发表多年来描述提供出色光学的系统属性,同时允许将标本维持不同的数量的时间。从密封的简单制备开始,复杂性不一显微镜载玻片上的盖玻片到复杂的灌注室 能够严格控制几乎所有的环境变量, 培养室旨在允许活体标本以高分辨率以最小的侵入观察到。
1960年代早期绿色荧光蛋白的发现最终预示着细胞生物学的新时代,使研究人员能够应用分子克隆方法,将荧光团部分融合到各种蛋白质和酶靶标上,以便使用光学显微镜和相关方法监测生命系统中的细胞过程。当与宽场荧光和共聚焦显微镜的最新技术进步相结合时,包括超快低光水平数码相机和多跟踪激光控制系统,绿色荧光蛋白及其色移遗传衍生物在数千个活细胞成像实验中显示出宝贵的服务。
直到 1980 年代后期,大多数生命科学研究人员通过使用固定和染色(实际上是非活的)标本捕获各种细胞学特征的单个快照来研究生物结构的复杂细节。然而,在过去的几十年里,生物和医学科学的研究在很大程度上已经将重点转移到研究生命系统中分子、细胞和整个生物体水平上发生的动态过程,时间尺度从毫秒到几小时不等。
在设计用于活细胞研究的光学显微镜系统时,主要考虑因素是检测器灵敏度(信噪比)、所需的图像采集速度和标本活力。在处理活细胞时,必须严格避免记录固定细胞和组织图像(其中光漂白是主要考虑因素)的相对较高的光强度和较长的曝光时间。
电动显微镜组件和附件使研究人员能够自动采集活细胞图像,对于时间间隔从毫秒到数十分钟或数百分钟的延时实验特别有用。各种售后辅助组件,如机电快门、微处理器控制的滤光片更换器(滤光轮)、电动载物台和轴向聚焦控制机构,可以改装到研究级显微镜上,并由配套工作站计算机使用市售的图像采集软件包进行交互控制。
在活细胞中,荧光蛋白最常用于跟踪蛋白质、细胞器和其他细胞区室的定位和动力学,以及细胞内蛋白质运输的示踪剂。荧光蛋白的定量成像很容易通过各种技术完成,包括宽场、共聚焦和多光子显微镜,为揭示细胞结构和功能的复杂性提供了一个独特的窗口。
使用传统的明场照明技术在体视显微镜下观察时几乎不可见的透明标本,在倾斜照明下观察时通常呈现具有鲜明对比度的伪三维外观。本交互式教程探讨了尼康倾斜相干对比度(OCC)照明系统产生的标本对比度变化,该系统旨在优化透射立体显微镜的对比度。OCC照明系统可用于尼康的通用主物镜设计体视显微镜。
第一台具有双目镜和匹配物镜的立体式显微镜由Cherubin d'Orleans于1671年设计和制造,但该仪器实际上是一种伪立体系统,仅通过应用辅助透镜即可实现图像竖立。
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